離心機(jī),你了解多少?
離心機(jī)是生物學(xué)實驗中*的儀器,看似通用的儀器,卻是有許多學(xué)問的,實驗操作中我們需要了解離心機(jī)知識,能夠合理利用它而更穩(wěn)定地為我們的實驗服務(wù)。
離心機(jī)作為一種實驗室通用儀器,幾乎每個實驗室都會配置一到兩臺甚至數(shù)臺。大家對其并不陌生,我們整理了一些關(guān)于離心機(jī)及其轉(zhuǎn)子種類的資料分享給大家。
一、離心技術(shù)的基本原理
1、離心力(force, F)
F = m * a = m * ω2r2
a:粒子旋轉(zhuǎn)的加速度
m:粒子的有效質(zhì)量,g為單位
ω:粒子旋轉(zhuǎn)的角速度,弧度/s為單位
r:粒子的旋轉(zhuǎn)半徑,cm為單位
2、相對離心力(relative centrifuge force, RCF)
通常離心力常用地球引力(g)的倍數(shù)來表示,因而稱為相對離心力(RCF)。常用數(shù)字×g來表示,例如13000g表示相對離心力為13000。相對離心力指在離心場中,作用與顆粒的離心力相當(dāng)于地球重力的倍數(shù),單位是重力加速度g(24500px/s2)。
RCF = ma/mg = mω2r2/mg = ω2r2/g
∵ω = 2π× (rpm)/60
∴RCF = 1.119 × 10-5 ×(rpm)2r
rpm:revolutions per minute為每分鐘轉(zhuǎn)數(shù)
由上式可知,只要給出旋轉(zhuǎn)半徑r,則RCF和rpm之間可以相互換算。
由于轉(zhuǎn)頭的形狀及結(jié)構(gòu)的差異,每臺離心機(jī)的離心管從管口至管底的各點與旋轉(zhuǎn)軸之間的距離是不一樣的,所以在計算時規(guī)定旋轉(zhuǎn)半徑均用平均半徑rav代替,即zui大半徑rmax和zui小半徑rmin的平均值。
一般,低速離心時常以轉(zhuǎn)速rpm來表示,高速離心時則以g表示。報告離心條件時使用RCF比rpm要科學(xué),因為它可以真實地反映顆粒在離心管內(nèi)不同位置的離心力及其動態(tài)變化。
吉迪離心機(jī)采用全觸摸5寸彩屏顯示,操作者可以一目了然的看到轉(zhuǎn)速和離心力。
二、離心機(jī)的種類
離心機(jī)按用途分為工業(yè)用離心機(jī)和實驗用離心機(jī)。后者根據(jù)功能又分為制備性離心機(jī)和分析性離心機(jī)。制備性離心機(jī)一般用來分離各種生物材料,分離的樣品量比較大,也是大多數(shù)科研實驗室配備的離心機(jī)種類。分析性離心機(jī)常用來研究純的生物大分子和顆粒的理化性質(zhì),一般有光學(xué)系統(tǒng),可監(jiān)測粒子在離心場中的行為,能推斷物質(zhì)的純度、形狀和分子量等,且都是超速離心機(jī)。此處和大家分享下幾種實驗室常用的制備性離心機(jī)。
制備性離心機(jī)根據(jù)轉(zhuǎn)速可分為普通離心機(jī)、高速離心機(jī)、超速離心機(jī)等。具體如下:
1、普通離心機(jī)
zui轉(zhuǎn)速6000rpm左右,zuii大RCF接近6000g,容量為幾十毫升至幾升,分離形式是固液沉降分離,其轉(zhuǎn)速不能嚴(yán)格控制,通常不帶冷凍系統(tǒng),室溫操作,用于收集易沉淀的大顆粒物質(zhì),如:細(xì)胞等。在細(xì)胞培養(yǎng)實驗室常常能見到。
2、高速離心機(jī)
轉(zhuǎn)速為2000-25000rpm,zui大RCF為89000×g,zui大容量可達(dá)3L,一般都有制冷系統(tǒng),以消除高速旋轉(zhuǎn)轉(zhuǎn)頭與空氣之間摩擦而產(chǎn)生的熱量,離心室的溫度可以調(diào)節(jié)和維持在0℃-4℃,可以嚴(yán)格準(zhǔn)確的控制轉(zhuǎn)速溫度和時間,并有指針或數(shù)字顯示。通常用于微生物菌體、細(xì)胞碎片、大細(xì)胞器、硫酸銨沉淀和免疫沉淀物等的分離純化工作,但不能有效地沉降病毒、小細(xì)胞器或單個分子。高速離心機(jī)是實驗室中zui常見的離心機(jī)類型,一般的分子實驗室都會配備。
3、超速離心機(jī)
轉(zhuǎn)速可達(dá)50000-80000rpm,RCFzuiu高可達(dá)510000×g,離心容量由幾十毫升至2升,分離形式為差速沉降分離和密度梯度區(qū)帶分離,需嚴(yán)格配平(誤差<0.1g)。與高速離心機(jī)的主要區(qū)別是增加了真空系統(tǒng)。常用于分離亞細(xì)胞器、病毒、核酸、蛋白質(zhì)和多糖等。超速離心機(jī)價格較高,一般只有大型實驗室或公