發(fā)酵罐主體采用不銹鋼材料,通常采用渦輪式攪拌器。攪拌軸與罐體的連接要進行無菌密封。發(fā)酵罐罐體底部設(shè)有空氣分布器或噴嘴,通過空氣過濾器的無菌空氣從孔徑幾毫米的多孔管鼓入培養(yǎng)液內(nèi)。攪拌器由置于罐頂?shù)臄嚢桦姍C以一定的轉(zhuǎn)速驅(qū)動旋轉(zhuǎn),通過攪拌渦輪產(chǎn)生的液體漩渦及剪切力,將鼓入的空氣打碎成小氣泡,并均勻分散在培養(yǎng)液中。這樣,既提供了細胞生長所需氧,同時又使培養(yǎng)液濃度均勻。
我們所用的發(fā)酵罐一般由以下五個系統(tǒng)組成:
一、發(fā)酵罐的機械攪拌系統(tǒng)
作為通氣攪拌罐的主要特征之一,機械攪拌系統(tǒng)提供的動力是機械攪拌罐質(zhì)量傳遞、熱量傳遞、混合和懸浮物均勻分布的基本保證。攪拌裝置的設(shè)計和選擇必須綜合考慮以滿足上述要求并降低造價和動力消耗。
機械攪拌系統(tǒng)由電機、變速箱、攪拌軸、攪拌槳、軸封和擋板組成。
二、發(fā)酵罐的通氣系統(tǒng)
通氣系統(tǒng)由無菌空氣制備系統(tǒng)、空氣分布裝置和出口氣體除菌系統(tǒng)組成。無菌空氣制備系統(tǒng)是一套相對獨立的復(fù)雜系統(tǒng)。
細胞生長和代謝所需的無菌空氣通過空氣分布管引入罐中??諝夥植脊芤话阄挥谙聦拥臄嚢铇恼路健楸WC氣泡的分散,多采用帶小孔的環(huán)狀空氣分布管,環(huán)的直徑一般等于攪拌槳的直徑。在大型通氣攪拌罐中,攪拌槳尖附近的剪切力非常大,一般足以達到充分打碎氣泡的目的,為防止培養(yǎng)液中的固體物料或菌絲堵塞空氣分布管,對某些特殊的發(fā)酵體系有時采用向下開口的單孔管。
三、發(fā)酵罐的溫度控制系統(tǒng)
為了保證為細胞生長和代謝提供合適的溫度,溫度控制系統(tǒng)也是通氣攪拌罐所*的。溫度控制系統(tǒng)由溫度測量電極、熱交換裝置及相應(yīng)的控制裝置組成。由于生物反應(yīng)和機械攪拌都是放熱過程,多數(shù)生物反應(yīng)體系在運行期間需要冷卻,就地滅菌后的培養(yǎng)基更要求快速泠卻。
四、發(fā)酵罐的pH值和溶氧測量與控制系統(tǒng)
細胞生長都有適pH值,因此需要對培養(yǎng)介質(zhì)的pH進行檢測和控制。
pH控制系統(tǒng)包括pH電極、酸及堿儲罐、耐酸或堿的管道和泵及相應(yīng)的控制系統(tǒng)組成。根據(jù)不同生物反應(yīng)體系的實際需要,可以只加酸或加堿系統(tǒng),也可以兩者都具備。在流加培養(yǎng)時,通過碳源或/和氮源的補料也能起到調(diào)節(jié)pH的作用。
五、發(fā)酵罐的消泡系統(tǒng)
消泡系統(tǒng)對好氧發(fā)酵過程是非常重要的。通氣攪拌罐的裝液量一般不能超過容器容積的70~80%,一方面,這是由于通氣后液面會有所上升;更重要的原因是,預(yù)留部分空間可以避免泡沫馬上沖出罐體,為消除泡沫提供一段緩沖的時間。一般對越容易產(chǎn)生泡沫的體系,裝液量要越少。圖9-4中,通氣攪拌罐頂部有一個額外的攪拌槳,稱為消泡槳,其作用就是通過機械作用消除泡沫。在多數(shù)情況下,僅憑消泡槳還不足以及時破壞所有的泡沫,因此通常還須進一步采用添加化學消泡劑的方法消泡。